ОПРЕДЕЛЕНИЕ РИЦИНА В КЛЕЩЕВИННОМ ЖМЫХЕ (ГОСТ 17290—71) | Отрасли животноводства

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РИЦИНА В КЛЕЩЕВИННОМ ЖМЫХЕ (ГОСТ 17290—71)

Автор текста: Животноводcтво | Категория: Качество Кормов | Теги:

Для определения рицина пользуются методом агглютинации эритроцитов. По наличию или отсутствию склеивания эритроцитов, смешанных с вытяжкой из клещевинного жмыха, и по степени разведения экстракта, при которой возможна агглютинация, судят о наличии и количестве рицина.Оборудование, реактивы, материалы. 1. Измельчитель лабораторный или ступка бронзовая. 2. Центрифуга лабораторная электрическая с числом оборотов не менее 3000 в минуту. 3. Сито штампованное с диаметром отверстий 1 мм. 4. Встряхиватель механический. 5. Шкаф сушильный с терморегулятором. 6. Воронки стеклянные по ГОСТ 8613—75. 7. Колбы конические по ГОСТ 10394—72 вместимостью 50, 100 и 250 мл. 8. Цилиндры измеритель-ше с носиком по ГОСТ 1770—74 вместимостью 100 и 250 мл. 9. Пипетки с делениями по ГОСТ 20292—74 вместимостью 1 и 5 мл. 10. Пробирки стеклянные центрифужные по ГОСТ 10515—75 вместимостью 25 мл. 11. Пробирки стеклянные химические по ГОСТ 10515—75. 12. Колбы мерные с пришлифованными пробками по ГОСТ 1770—74 вместимостью 100 мл или цилиндры измерительные с пришлифованными пробками по ГОСТ 1770—74 вместимостью 100 мл. 13. Палочки стеклянные, оплавленные с обоих концов. 14. Кровь кролика свежевзятая дефибринированная. 15. Натрий хлористый по ГОСТ 4233—77, 0,9 %-ный раствор. 16. Толуол по ГОСТ 5789—78. 17. Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76. 18. Штатив для пробирок. 19. Пробки корковые укупорочные центритные по ГОСТ 5541—76 или пробки резиновые конусные по ГОСТ 7852— 76.

Подготовка к испытанию. Измельчают шрот до прохода через сито с диаметром отверстий 1 мм. Для приготовления вытяжки взвешивают 20 г клещевинного шрота с точностью ±0,01 г, заливают 100 мл раствора хлористого натрия и перемешивают на механическом встряхи-вателе в течение 30 мин. После этого жидкость фильтруют через бумажный фильтр или центрифугируют, после чего в вытяжку добавляют 0,2 мл толуола.

Для приготовления кровяной взвеси 3 мл свежевзятой дефибринированной крови наливают в пробирку, отмечая уровень ее на стенке. Затем кровь разбавляют 9 мл раствора хлористого натрия, осторожно перемешивают и центрифугируют в течение 8 мин. Осторожно пипеткой отбирают верхний слой жидкости, стараясь не задевать осадка эритроцитов. Осадок вновь разбавляют 9 мл раствора хлористого натрия, повторяют перемешивание, центрифугирование и удаление жидкости.

Если после вторичного промывания жидкость над осадком становится бесцветной и прозрачной, промывку заканчивают. Промытые эритроциты разбавляют раствором хлористого натрия до первоначального объема крови (3 мл) и осторожно перемешивают. Из смеси отбирают пипеткой

2 мл и разбавляют раствором хлористого натрия до 100 мл в мерной колбе или цилиндре. Полученную кровяную смесь хранят в холодильнике и используют в течение 4 суток.

Допускается применять в качестве дополнительного контрольного раствора вытяжку из семян клещевины, приготовленную аналогично из шрота.

Проведение испытания. Взбалтывают вытяжку и отбирают пипеткой по 5 мл в две сухие пробирки. В две другие пробирки для контроля берут по 5 мл раствора хлористого натрия. Кровяную взвесь перед использованием осторожно перемешивают 2—3 раза опрокидыванием колбы или цилиндра для получения равномерной эмульсии кровяных шариков. Взбалтывание или встряхивание не рекомендуется. Сухой пипеткой отбирают по 4 мл кровяной взвеси и добавляют в каждую пробирку с испытуемой вытяжкой и с контрольным раствором хлористого натрия. Пробирки закрывают корковыми или резиновыми пробками.

Содержимое пробирок осторожно перемешивают опрокидыванием и выдерживают в термостате в течение 1 ч при 37 °С. По истечении этого времени пробирки вновь осторожно перемешивают опрокидыванием так, чтобы все эритроциты поднялись со дна, и просматривают содержимое пробирок, устанавливая отсутствие или наличие рицина.

Если рицин не обнаружен, пробирки оставляют при комнатной температуре на 18 ч, после чего содержимое пробирки осторожно перемешивают опрокидыванием и вновь устанавливают отсутствие или наличие рицина.

Обработка результатов. Наличие или отсутствие рицина определяют визуально по картине гемагглюти-нации. При отсутствии его жидкость равномерно розово-мутная, если пробирку встряхнуть, муть волнообразно движется, красных комочков нет.

При наличии следов рицина жидкость явно прозрачнее контрольной, красные комочки видны, но не так отчетливо. Наряду с комочками видна розовая муть, волнообразно движущаяся при сотрясении пробирки. При наличии большого количества рицина жидкость прозрачная и в ней видны плавающие крупные хлопья мути, волнообразно движущейся при встряхивании пробирки.

Шрот считается обезвреженным, когда его вытяжка, обработанная кровяной взвесью, дает отрицательную реакцию на рицин.



Козоводство Коневодство КролиководствоОвцеводство ПтицеводствоПчеловодство СвиноводствоСкотоводствоСадоводство



2013-10-31_021908

Оставьте свой коментарий

Решите задачу если вы не бот)) *

Вы можете использовать это HTMLтеги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>